Page 4 - E-Tez Bülteni Eylül 2025, SAYI 3
P. 4

DOKTORA TEZİ
                            Biyoteknoloji Anabilim Dalı
                 Geobacillus stearothermophilus Triaçilgliserol Lipazının
                  (GstLipC) Katalitik Etkinliğinin Arttırılması ile Biyolojik
                                 İndikatörün İyileştirilmesi
                                     Arife KAÇIRAN

                          Tez Danışmanı: Prof. Dr. Ali Osman BELDÜZ
                                        Tez Özeti
        Geobacillus  stearothermophilus  sporları,  yüksek  sıcaklığa  karşı  dirençli  olup,  sterilizasyon  süreçlerinde  biyoindikatör  olarak
        kullanılmaktadır.  Söz  konusu  sporların  çimlenmesi,  enzimlerin  sıralı  aktivasyonu  ile  ilerleyen  yüksek  derecede  düzenlenmiş  bir
        biyolojik  süreçtir  ve  bu  süreçte  çeşitli  proteinlerin  önemli  işlevler  üstlendiği  bilinmektedir.  Bu  çalışmada,  Geobacillus
        stearothermophilus’ta  bulunan  ve  spor  germinasyon  sürecinde  kritik  role  sahip  olan  GDSL  ailesi  lipazının  karakterizasyonu
        gerçekleştirildi. Elde edilen bu enzim üzerinde biyoinformatik çalışmalar ile dört farklı mutasyon çalışması yapıldı ve yaban tip
        GDSL lipazı ile kıyaslandı. Mutant enzimler pNW33N plazmitine klonlanarak Geobacillus stearothermophilus’a transformasyonu
        gerçekleştirildi.  Devamında  yaban  tip  ve  rekombinant  plazmiti  bulunduran  Geobacillus  stearothermophilus  için  sporulasyon  ve
        germinasyon  çalışmaları  gerçekleştirildi.  Germinasyon  kinetiği,  OD600  absorbans  değişimi  üzerinden  spektrofotometrik  olarak
        değerlendirildi.  Elde  edilen  bulgular,  hem  yaban  tip  hem  de  mutant  GDSL  lipazların  karakterize  edildiğini  ve  mutasyonların
        enzimin  Km  değerinde  anlamlı  değişimlere  yol  açtığını  gösterdi.  Ayrıca,  yaban  tip  ve  mutant  sporların  germinasyon  süreçleri
        arasında belirgin farklılıklar gözlemlendi.


                   Anahtar kelimeler: Geobacillus stearothermophilus, sporulasyon, germinasyon, GDSL lipazı
   1   2   3   4   5   6   7   8   9